熒光PCR凍干之Tris

Tris又叫三羥甲基氨基甲烷。是一種白色結(jié)晶或粉末， 溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、 苯， 是一種有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。其本身有很高的緩沖能力， 在水中溶解度高，對很多酶呈惰性反應(yīng)， 它的這一特性使得 Tris 成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。用于穩(wěn)定反應(yīng)體系的 pH，在 pH7.5-9.0 之間有較強的緩沖能力。其緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。其本身也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。熒光PCR凍干體系優(yōu)化方法：沒有經(jīng)驗采用單一因素法，有一定經(jīng)驗的采用多因素法。單一因素法篩選出保護效果比較好的保護劑，再將保護效果好的保護劑進行組合，產(chǎn)生終配方。

Pilot7-12T應(yīng)用示例（熒光PCR凍干）：

1. 探針、底物、引物原料要求確定。
2. 凍干溶液配方開發(fā)，采用正交法或響應(yīng)曲面法進行輔料篩選。
3. 選擇適合的包材和模具。
4. 設(shè)計凍干曲線配合輔料篩選。
5. 確定配方及工藝。
6. 穩(wěn)定性測試。
7. 根據(jù)穩(wěn)定性測試結(jié)果修正工藝或配方。
8. 整個環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設(shè)備、人員的結(jié)合。